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用NaCI溶液从凝胶中回收DNA或RNA片段


行业类别:化学药技术与产品
所处阶段:规模化生产阶段
持有单位:华中科技大学
转让方式:技术转让,技术许可,
转让价格:面议

成果信息

本项目中,用NaCI溶液从凝胶中回收DNA或RNA方法如下: (1)取一干净1.5 ml EP离心管,称取其重量; (2)切取含DNA或RNA条带的凝胶,放入1.5 ml EP离心管中; (3)再次称取离心管重量,并计算凝胶重量; (4)尽量倒碎凝胶,以便加入NaCI溶液后DNA或RNA快速从凝胶中析出; (5)加入3-4倍体积(V/W)的0.4 M NaCI溶液; (6)震荡混匀1分钟,然后置于4 ℃ 过夜,对DNA或RNA进行洗脱,其间混摇2-3次以促进DNA或RNA析出; (7)吸取上清,加入3-4倍无水乙醇,混匀; (8)置冰上至少2小时或于-20 ℃过夜,以促进DNA或RNA沉淀; (9)4 ℃ 14,000rpm离心15分钟,以沉淀DNA或RNA; (10)吸去上清,沉淀空气干燥后加适量TE或水溶解,4 ℃或-20 ℃保存备用。 (11)上述方法所得DNA的回收率一般在60~80%之间, RNA的回收率一般在90~100%之间(注意:回收RNA时,要使用无RNA酶的试剂和器具),且本技术非常成熟。 )

背景介绍

从琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA或RNA是实验室一种常见操作,目的是分离和纯化DNA或RNA片段。目前最常用的是用离心柱分离纯化试剂盒进行操作。然而此类试剂盒比较昂贵,一般实验室无力购买,且操作步骤较为烦琐,导致不能广泛应用。因此,急需一种价格低廉,能够广泛应用的从琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝中回收DNA或RNA方法。)

应用前景

本项目可用于临床和基础各个分子生物实验室,市场前景广阔,经济效益可观。)