成果信息
本发明是将人β-防御素-2构建成植物表达载体质粒,再将该载体质粒导入植物中,目的之一是在植物体中生产空间结构与天然hBD-2完全一致、抗菌活性高的防御素,然后从转基因植物中提取hBD-2,以降低hBD-2的生产成本;目的之二使植物具有抗细菌、病毒及(或)真菌的特点,从而培育出作物、林木、果蔬以及花卉等植物抗病新品种,为农林果木业生产以及减少农药污染作出贡献。本发明的重组人β-防御素-2植物表达载体rp1300-hBD2含有两个CaMV 35S启动子,能高效表达目的基因,即高效地在各种类型的植物细胞中启动基因的表达;载体中含有卡那霉素抗性基因,可对转化的农杆菌阳性克隆进行筛选;含有潮霉素抗性基因,适于植物转化后用化学试剂潮霉素进行阳性转化体筛选。由于不含报告基因可表达具有正确空间结构和生物活性的人β防御素-2。将重组人β-防御素-2植物表达载体rp1300-hBD2转入烟草后,经PCR、RT-PCR、 Northern-Blot以及Western-Blot检测证实,人β-防御素-2基因已进入烟草,并能够正确表达人β防御素-2蛋白;转化烟草叶的上清液对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌都具有较强的抗菌活性,说明转化烟草不仅能表达人β防御素-2而且还具有较强抗菌生物活性。)
背景介绍
防御素最重要的生物学活性就是其广谱高效的抗菌和抗病毒活性,并且未发现有耐药菌株产生,从进化角度看,动物应用这些分子来对抗微生物感染历经千百万年仍显出强大的效力,是一类天然有效的抗感染物资,因此,人们把防御素看作了一个对付细菌耐药的可能的突破口对其投入了较大的关注,其中最引人注目的就是β-防御素。)
应用前景
本项目培育出作物、林木、果蔬以及花卉等植物抗病新品种,为农林果木业生产以及减少农药污染作出贡献,可见具有很大的实用性。)