成果信息
本发明提供了一种使用简单方便,灵敏度和特异性高的荧光定量PCR试剂盒,能够优化提高PCR的扩增效率,降低PCR污染发生率,准确、快速检测标本中的BDV核酸,以及本发明提供的博尔纳病病毒p24片段实时荧光定量PCR检测试剂盒包括:10×逆转录反应液、AMV逆转录酶、2×荧光定量PCR反应液、Taq聚合酶、标准品、阴性对照。其中荧光定量PCR反应液为经过优化的反应液。能够缩短反应时间和降低PCR污染可能性,还能显著提高定量的准确性和扩增效率。使用该试剂盒可以对动物样本进行大规模筛选,通过流行病调查来了解该病毒在我国的分布及流行特征,为防治将来可能出现大规模的暴发流行提供基础,此外在临床检验中可以进一步分析 BDV 和人类精神疾病的相关性。)
背景介绍
博尔纳病病毒(BDV)是一种嗜神经性的单股负链RNA病毒,BDV的感染宿主包括了大部分温血动物,而根据一些研究认为BDV感染也可能于人类精神疾病有关,在我国和其他国家一些地区动物、精神疾病患者和脑炎患者中均有散在BDV疑似阳性病例报导;BDV基因组含有6个开放式读码框(ORF),其中ORFⅡ编码磷蛋白(p24),磷蛋白作为抗原参与血清免疫反应可以检测判断是否有病毒感染存在,此外p24基因由于序列高度保守,并且在检测同等病毒量时其敏感性要高于核蛋白基因,故p24片段是在BDV核酸检测上的主要指标。)
应用前景
目前该发明对临床病人检测阳性率为3.6%,对动物检测阳性率为4.4%,而且该试剂盒敏感性、特异性、重复性和稳定性均佳,是BDV基础研究、流行病学调查、临床检测的良好工具,市场应用前景较为广阔。 )